胎牛血清存儲(chǔ)與使用都有講究
胎牛血清從字面意思就可以知道是未出世的小牛的血清,很多哺乳動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)都是需要用到胎牛血清的,因此應(yīng)用領(lǐng)域可謂甚廣,包含人類或者獸類的疫苗,生物制藥等等,胎牛血清可以有效的幫助我們把控質(zhì)量!
胎牛血清的主要來(lái)源地就是那些大量養(yǎng)牛的國(guó)家,包括美國(guó)、澳大利亞、新西蘭、加拿大及南美和中美洲地區(qū),由政府機(jī)構(gòu)管理血清制品的生產(chǎn)及收集過(guò)程。
胎牛血清不是可以直接使用的,不論是存儲(chǔ)還是使用都是相對(duì)來(lái)說(shuō)較為復(fù)雜的,今天小編就與大家分享下一般的使用步驟:
胎牛血清的常規(guī)處理方式是熱鈍化,即放在56°水浴30分鐘;其目的是使血清中的補(bǔ)體成分及一些未知的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制分子失活。
實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或*沒(méi)有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量!
透析處理能夠除去胎牛血清中所有分子量小于10,000Da的分子。例如,激素、細(xì)胞因子、葡萄糖、氨基酸還有許多其它分子,都能夠被除去。透析也能除去胎牛血清中的抗生素及其它內(nèi)源分子。
胎牛血清常規(guī)的滅菌方法是多次透過(guò)0.1um的濾膜以消除微生物污染,而gamma照射能夠鈍化牛群中常見(jiàn)的病毒。但是,一些類型的病毒能夠抵抗gamma照射,比如細(xì)小病毒。
后要注意的是:胎牛血清一般是在-5°到-20°之間凍存,2°到8°之間融化。一個(gè)比較好的辦法是,將胎牛血清分裝到50ml管中,這樣做就避免了反復(fù)凍融對(duì)血清造成的危害。血清融化后常出現(xiàn)沉淀,可能是血清蛋白變性造成的。簡(jiǎn)短離心即可除去沉淀,并且,這些沉淀一般不會(huì)影響血清質(zhì)量的。